ABSTRACT
El déficit y exceso de vitamina A provoca malformaciones congénitas que afectan distintos órganos y sistemas. El objetivo de este estudio fue determinar el efecto que causa la administración de ácido retinoico a distintas dosis sobre la morfogénesis ósea del esqueleto axial en embriones de ratón Mus musculus. Mediante aleatorización simple se distribuyeron hembras recién preñadas en 4 categorías: A, B, C y D. El día 8 post fecundación (p.f), se administró 40 mg/kg de peso de ácido retinoico al grupo A, 20 mg/kg de peso de esta solución al grupo B, 1 ml/kg de peso de dimetil sulfóxido al grupo C, y el grupo D es grupo control. El día 17 de la gestación las hembras y sus fetos fueron anestesiadas y eutanasiadas con sobredosis de pentotal sódico intraperitoneal. Los fetos de cada camada fueron procesados mediante diafanización y tinción con azul de Alcian para destacar cartílago hialino y alizarina para observar tejido óseo. Los resultados se expresaron en porcentajes de malformaciones en los siguientes tres segmentos: 1) cráneo-columna cervical, 2) segmento torácico y abdominal y 3) cintura pélvica, considerándose un 100% cuando la totalidad de los elementos óseos se encontraban comprometidos. Se utilizó la prueba de Fisher para la comparación de frecuencias de malformaciones y se consideró estadísticamente significativo cuando p<0,05. En el grupo A se evidenciaron malformaciones mayores como ausencia de huesos frontales y parietales, exencefalia, defectos en el número de vértebras, y fusiones de costillas; y en el grupo B se observaron malformaciones menores como alteraciones numéricas y fusiones de costillas, existiendo diferencias significativas entre ambos grupos. En los grupos C y D no se consignaron malformaciones. El ácido retinoico administrado intraperitonealmente el dìa 8 p.f en dosis de 40 y 20 mg/kg de peso se comporta como un teratógeno en los embriones de ratón, existiendo además diferencias significativas entre las malformaciones generadas por ambas dosis de ácido retinoico. La primera concentración afecta los huesos de los tres segmentos estudiados (cráneo-cervical, toracoabdominal, y pélvico) y la segunda concentración sólo afecta a dos segmentos (cráneo-cervical y toracoabdominal). Ambos tratamientos afectan los segmentos en una gradiente céfalo caudal, independiente del origen embrionario de las estructuras. Esto se debería a que los cambios en las gradientes de ácido retinoico alteran el comportamiento de células de la cresta neural craneal y el orden de la expresión de genes Hox.
The deficit and excess of vitamin A causes birth defects affecting different organ systems. The objectives of this study are to determine the effect caused by the administration of different doses of retinoic acid on bone morphogenesis of the axial skeleton in embryonic mouse Mus musculus. By simple randomization newly pregnant females were distributed into 4 categories: A, B, C and D. On day 8 post fertilization, 40 mg/kg was administered by weight of retinoic acid to the group A, 20 mg/kg body weight of the group B solution 1 ml/kg body weight of dimethyl sulfoxide and group C. Group D is the control group. On day 17 of gestation the females and their fetuses were anesthetized and euthanized with an overdose of intraperitoneal sodium pentothal. Fetuses from each litter were processed using diaphanization and Alcian blue staining to hyaline cartilage and alizarin to observe bone tissue. The results are expressed as percentages of malformations in the following three segments: 1) cranio-cervical spine, 2) thoracic and abdominal segment and 3) pelvic segment, considering 100% when all the bony elements were compromised. Fisher's exact test for comparison of frequencies of malformations was used and considered statistically significant when p<0.05. In group A, major malformations and defects were evident in the indemnity of the cranial vault, exencephaly, defects in the number of vertebrae, and fusion of ribs. In group B minor malformations as numerical alterations and rib fusions were observed. Significant differences were found between both groups. In groups C and D no malformations were recorded. Retinoic acid administered intraperitoneally at doses of 40 and 20 mg/kg acts as a teratogen in mouse embryos. There are significant differences between the defects induced by concentrations of 40 mg/k and 20 mg/k of retinoic acid. Both concentrations affect the bones of the three segments studied (cranio cervical, thoraco-abdominal and pelvic) in a cephalo caudal gradient, independent of the embryonic origin of the structures. Changes in retinoic acid concentration alter the behavior of cranial neural crest and changing the order of the HOX gene expression in the axial skeleton.